用于实验室诊断中枢神经系统感染的标本GydF4y2Ba

中枢神经系统感染包括脑膜炎GydF4y2Ba

• 怀疑中枢神经系统感染的患者诊断的第一步是腰椎穿刺（脊柱水龙头）。GydF4y2Ba

样品：GydF4y2Ba脑脊液（CSF）GydF4y2Ba

CSF的收集和运输：GydF4y2Ba

• 无菌CSF被收集。GydF4y2Ba
• 在L3，L4或L5之间的腰椎区域，将针头插入蛛网膜下腔空间（腰椎穿刺）。GydF4y2Ba
• 在无菌收集管中，应收集三个或四个CSF的管。它不应包含添加剂。GydF4y2Ba
• 管1用于：GydF4y2Ba
  • 化学研究GydF4y2Ba
  • 葡萄糖和蛋白质计数GydF4y2Ba
  • 免疫学研究GydF4y2Ba
• 试管2用于培养。GydF4y2Ba
• 试管3和4用于细胞计数和差异计数。GydF4y2Ba
• 要收集的体积的数量取决于患者中可用的体积，成年人和新生儿之间可能有所不同。GydF4y2Ba
• 当针头首先穿刺蛛网膜下腔空间时，观察到CSF的开口压力。GydF4y2Ba
• 在高开口压力下，应缓慢收集CSF，以防止收集大量的流体。GydF4y2Ba
• 为了检测分枝杆菌和真菌，建议至少5至10毫升。GydF4y2Ba
• 离心和随后的文化进行了。GydF4y2Ba
• 如果样本不足，可以看到错误的结果。GydF4y2Ba
• CSF应尽快发送到实验室。GydF4y2Ba
• 在一个小时或更长时间后延迟的情况下，诸如GydF4y2Ba链球菌GydF4y2Ba肺炎GydF4y2Ba，可能无法检测到。GydF4y2Ba
• 不应将CSF冷藏用于微生物学研究。GydF4y2Ba
• 在延迟的情况下，应将其留在室温下或在35°C下孵育。GydF4y2Ba
• 对于病毒研究，可以在收集后23小时或在-70°C冷冻后冷藏CSF。GydF4y2Ba
• 对于血液学研究，可以将CSF标本冷藏，GydF4y2Ba
• 对于化学和血清学，可以冷冻CSF（-20°C）。GydF4y2Ba

CSF的初始处理：GydF4y2Ba

• 所有用于细菌，真菌或寄生研究的CSF标本都应离心。GydF4y2Ba
• 应使用大于1 mL的体积。GydF4y2Ba
• 离心应以1500×GydF4y2BaGGydF4y2Ba15分钟。GydF4y2Ba
• 应仔细处理可疑的隐孢子球或分枝杆菌标本。GydF4y2Ba
• 当CSF少于1毫升可用时，应进行革兰氏污渍，并直接将其镀到血液和巧克力琼脂板上。GydF4y2Ba
• 将上清液移至无菌管，剩下约0.5 mL的流体。GydF4y2Ba
• 为了进行视觉检查和培养，剩余的流体用于悬浮沉积物。GydF4y2Ba
• 可以使用上清液：GydF4y2Ba
• 测试抗原的存在GydF4y2Ba
• 快速诊断测试（垂直流免疫色谱法）GydF4y2Ba
• 为了GydF4y2Ba脑膜炎GydF4y2Ba
• 用于化学评估（例如蛋白质，葡萄糖，乳酸，C反应蛋白）。GydF4y2Ba

实验室诊断：GydF4y2Ba

• 医师与微生物实验室之间的交流对于适当诊断和治疗患者至关重要。GydF4y2Ba
• 在几乎所有病例中，可以排除患有正常液体参数的患者的急性细菌性脑膜炎的诊断。GydF4y2Ba
• 类似的标准已被用来排除CSF标本上的结核病和梅毒血清学的涂片和培养物的性能。GydF4y2Ba

1. CSF中病因学的视觉检测：GydF4y2Ba

• 检查了CSF沉积物是否存在细胞和生物。GydF4y2Ba

i）染色的沉积物：GydF4y2Ba

• 革兰氏染色应在所有CSF沉积物上进行。GydF4y2Ba
• 使用受污染的幻灯片可能会产生假阳性涂片。GydF4y2Ba
• 沉积物应彻底混合，并将堆滴放在幻灯片中。GydF4y2Ba
• 幻灯片应无菌或酒精清洗。GydF4y2Ba
• 沉积物绝不应散布在幻灯片表面上。GydF4y2Ba
• 这是因为很难找到少量的微生物。GydF4y2Ba
• 允许沉积物滴干。GydF4y2Ba
• 然后将其加热或甲醇固定。GydF4y2Ba
• 然后，它被克或杂氨橙色染色。GydF4y2Ba
• 可以通过Acridine Orange荧光色染色来对高功率放大倍数（400×）的载玻片进行更快的检查。GydF4y2Ba
• 荧光细菌可以轻松可视化。GydF4y2Ba
• 可以使用革兰氏污渍（直接在尖氨橙橙上，可以做到生物体的存在和形态的确认。GydF4y2Ba
• 使用细胞纺丝离心机是制备染色幻灯片的绝佳替代方法。GydF4y2Ba
• 它浓缩了细胞材料，细菌细胞最多可达1000倍。GydF4y2Ba
• 进行离心进行，然后将CSF浓缩到微观载玻片的圆形区域。GydF4y2Ba
• 然后将其固定，染色和检查。GydF4y2Ba
• 应该为存在或不存在细菌，炎性细胞和红细胞的情况进行报告。GydF4y2Ba

ii）湿制准备：GydF4y2Ba

• 通过这种方法最好观察到变形虫。GydF4y2Ba
• 在相对比显微镜下，可以将沉积物作为湿制剂检查。GydF4y2Ba
• 光学显微镜可以通过稍微关闭冷凝器来用作替代方案。GydF4y2Ba
• 必须将变形虫与偶尔出现在CSF中的运动巨噬细胞区分开。GydF4y2Ba
• 三色染色可用于分化与体细胞的变形虫。GydF4y2Ba
• 在草坪上GydF4y2Ba克雷伯氏菌肺炎GydF4y2Ba或者GydF4y2Ba大肠杆菌GydF4y2Ba，可以培养致病性变形虫。草地。GydF4y2Ba

iii）印度墨水染色：GydF4y2Ba

• 加密型新羊角GydF4y2Ba由大型多糖胶囊组成，可以通过印度墨水染色来形象。GydF4y2Ba
• 对于囊抗原，乳胶凝集测试更灵敏，非常具体。GydF4y2Ba
• 建议比印度墨水染色进行抗原测试。GydF4y2Ba
• 在艾滋病患者的情况下，培养是必不可少的GydF4y2Ba新羊角GydF4y2Ba可能不存在。GydF4y2Ba
• 一滴CSF的沉积物与印度墨水的三分之一墨水混合在一起，用于印度墨水准备。GydF4y2Ba
• 通过添加0.05毫升硫镁，可以保护印度墨水免受污染。GydF4y2Ba
• 通过混合CSF和墨水来制作光滑的悬架。GydF4y2Ba
• 然后将盖玻片应用于滴头。GydF4y2Ba
• 然后在高功率放大倍数（400×）下检查特征性封装的酵母细胞。GydF4y2Ba
• 可以在浸入油下进行检查。GydF4y2Ba
• 白细胞不得与酵母混淆。GydF4y2Ba
• 与母细胞小的封装芽的存在是诊断性的。GydF4y2Ba

2.直接检测病因：GydF4y2Ba

抗原检测GydF4y2Ba：GydF4y2Ba

• 为了快速检测CSF中的抗原，可以使用商业试剂和试剂盒。GydF4y2Ba
• 通过乳胶凝集，可以从CSF进行快速抗原检测。GydF4y2Ba
• 抗体涂层的颗粒与特定的抗原结合，从而导致宏观可见的凝集。GydF4y2Ba
• 可溶性囊膜多糖，包括B组链球菌多糖，非常适合用作桥接抗原。GydF4y2Ba
• 凝集分析中存在多克隆或单克隆抗体或抗原。GydF4y2Ba
• 已经开发了不同的商业系统。GydF4y2Ba
• 可溶性抗原可能会集中在尿液中GydF4y2Ba链球菌agalactiaeGydF4y2Ba和GydF4y2Ba流感嗜血杆菌。GydF4y2Ba
• 对于抗原检测测试系统的性能，必须遵循制造商的方向GydF4y2Ba
• 一些系统也可能需要对通常持续5分钟的样品进行预处理。GydF4y2Ba
• 建议使用商业体液抗原检测试剂盒的实验室进行预处理，称为抗原程序快速提取（REAP）。GydF4y2Ba
• 只有有限数量的临床有用情况需要细菌抗原测试（BAT）。GydF4y2Ba
• 诊断和管理细菌性脑膜炎的实践指南不建议常规使用BAT。GydF4y2Ba

涉及脑膜炎的细菌：GydF4y2Ba

加密赛车：GydF4y2Ba

• 为了检测多糖囊抗原GydF4y2Ba加密赛车，GydF4y2Ba这些试剂可在商业上购买。GydF4y2Ba
• 当在CSF标本中获得加密局局的阳性结果时，应进行第二次乳胶凝集试验，用于类风湿因子。GydF4y2Ba
• 乳胶凝集测定法（众多商业制造商）和酶免疫测定均可用于检测加密球菌抗原。GydF4y2Ba
• 假阴性反应可以在未稀释的标本中看到，其中包含大量囊抗原。GydF4y2Ba
• 假阴性反应是由Prozone现象引起的。GydF4y2Ba
• 艾滋病患者的抗原滴度可能超过100,000。GydF4y2Ba
• 它需要许多稀释液才能达到终点。GydF4y2Ba
• 寄生虫和病毒也参与脑膜炎GydF4y2Ba

  应维持自由活动的变形虫和病毒剂的培养条件，以检测病毒和寄生虫。GydF4y2Ba

3.分子方法：GydF4y2Ba

• PCR（聚合酶链反应）GydF4y2Ba
• 实时PCRGydF4y2Ba

4.其他测试GydF4y2Ba

• 利卢斯裂解物测试GydF4y2Ba
• CSF乳酸确定，GydF4y2Ba
• C反应蛋白GydF4y2Ba
• 质谱GydF4y2Ba
• 气液色谱法GydF4y2Ba

5.文化：GydF4y2Ba

• 常规细菌学介质：巧克力琼脂板，5％绵羊血琼脂板和富集汤，通常没有指示。GydF4y2Ba
• 血琼脂板有助于识别GydF4y2Ba肺炎。GydF4y2Ba
• 为了隔离GydF4y2Ba流感GydF4y2Ba和GydF4y2Ban. -Meningitidis，aGydF4y2Ba使用巧克力琼脂板。GydF4y2Ba
• 板应在37°C下以5％至10％二氧化碳（CO2）孵育至少72小时。GydF4y2Ba
• 如果没有CO2孵化器，则可以使用蜡烛罐。GydF4y2Ba
• 汤应在37°C的空气中孵育至少5-10天。GydF4y2Ba
• 当革兰氏染色显示形态上类似于厌氧细菌时，也可以接种厌氧血琼脂板。GydF4y2Ba
• 如果怀疑脑脓肿，则还使用厌氧血琼脂板。GydF4y2Ba
• 对于CSF真菌培养物，应接种两滴良好的沉积物：GydF4y2Ba
• Sabouraud Dextrose琼脂GydF4y2Ba
• 其他含有培养基的非血液GydF4y2Ba
• 大脑心脏输注5％的绵羊血。GydF4y2Ba
• 真菌培养基的孵育应在30°C下进行4周进行。GydF4y2Ba
• 如果可能的话，应接种两组介质。GydF4y2Ba
• 一组应在30°C下孵育，另一组在35°C下孵育。GydF4y2Ba

样品：GydF4y2Ba脑脓肿/活检样品GydF4y2Ba

大脑和活检的收集，运输和处理GydF4y2Ba

• 在厌氧条件下，应提交活检标本或脑脓肿的抽吸物。GydF4y2Ba
• 设备也可用于运输。GydF4y2Ba
• 拭子不被视为最佳标本。GydF4y2Ba
• 如果使用拭子收集脓肿材料，则应在运输过程中将其保持在厌氧环境中。GydF4y2Ba
• 在铺板和涂片制备之前，应在无菌盐水中匀浆活检标本。GydF4y2Ba
• 应将加工保持在最低限度以减少氧合。GydF4y2Ba
• 接种应在5％的绵羊血和巧克力琼脂板上进行，以进行脓肿和活检标本。GydF4y2Ba
• 在35°C的72小时内，应在5％至10％的CO2中进行孵育。GydF4y2Ba
• 此外，应在35°C的厌氧环境中接种维生素K和Hemin的厌氧琼脂板和肉汤，维生素K和Hemin应接种并孵育。GydF4y2Ba
• 厌氧培养板的孵育至少72小时。GydF4y2Ba
• 孵育48小时后检查。GydF4y2Ba
• 厌氧汤应至少孵育5天。GydF4y2Ba
• 当怀疑真菌时，应接种真菌培养基，例如血液和抗生素或抑制性霉菌琼脂。GydF4y2Ba